靈敏度高是ELISA試劑盒的一大優點,而這其實也是和檢測樣本有些關聯的,我們一般說來,如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。
一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準確的,低于這個值因為與曲線是個“S”型結構有關,所以結果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
那么ELISA試劑盒檢測哪些范圍呢?一般說來,診斷試劑的檢測范圍以ng/ml計。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標蛋白,范圍可隨樣本的類型而變化。所以實驗前應通過文獻和預實驗的方法確定樣本是否在所購試劑盒的范圍內,如果不在檢測范圍內,分兩種情況對待。
A、如果樣本中目標蛋白太低,需找相應靈敏度更高的試劑盒來檢測或濃縮樣本;
B、如果樣本中目標蛋白太高,則需要進一步稀釋后進行檢測
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