黃曲霉素B1 ELISA試劑盒采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有黃曲霉素偶聯(lián)抗原,加入黃曲霉素B1(AFB1)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離黃曲霉素B1(AFB1)與微孔條上預(yù)包被的黃曲霉素B1偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗黃曲霉素B1(AFB1)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中黃曲霉素B1(AFB1)含量成反比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中黃曲霉素B1(AFB1)的含量.
樣品處理程序(樣品在提取過(guò)程中,要嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作,提取過(guò)程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
1.取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
2.強(qiáng)力振蕩3分鐘
3.用Whatman 濾紙過(guò)濾
4.取100ml處理后的樣品,加入400ml樣本稀釋液
5.取50μl稀釋液進(jìn)行分析(稀釋倍數(shù)10)
注意事項(xiàng)
1.使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。
2.不要使用過(guò)期試劑盒。
3 試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。
4.標(biāo)準(zhǔn)品中含有黃曲霉素B1(AFB1),使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。
5.終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6.不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。
7.不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
8.稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
9.混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。