近日,上海大學(xué)金老師實驗后來電向我司咨詢ELISA空白孔為什么顯現(xiàn)陽性?金老師的實驗流程大致是:包被放置一晚4攝氏度12小時->一抗65分鐘->二抗45分鐘->顯色15分鐘“->"表示洗板,洗五次,每次3min。空白孔為不包被,加一抗和二抗,結(jié)果空白孔比陽性值還高。
通過了解我司技術(shù)人員經(jīng)過詳細(xì)分析后給出以下幾種可能:
1.手工洗板嗎,臨近空白孔的標(biāo)準(zhǔn)品濃度zui高,有可能甩液體的時候沒注意,標(biāo)準(zhǔn)孔的倒流到空白孔去了哦!
2.如果沒有封閉,有可能是未經(jīng)過封閉的板子對一抗有吸附作用,吸附一抗后二抗自然色。
3.如果你封閉了,說明你用的封閉液中的蛋白能被一抗結(jié)合。結(jié)合上一抗造成顯
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