七月初,浙江大學(xué)張同學(xué)由學(xué)校實(shí)驗(yàn)室的其他同學(xué)介紹與我司取得。并訂購(gòu)了人MDA、GSH-PX、SOD、TAOC ELISA試劑盒。星期一老師做了人GSH-PX elisa實(shí)驗(yàn)。介紹自己在洗板操作過(guò)程遇到棘手問(wèn)題,麻煩我司技術(shù)給她提供解決處理方法及建議。主要問(wèn)題如下:
問(wèn)題一:說(shuō)明書(shū)上說(shuō)洗板時(shí)要把孔里的水甩干,可我做的時(shí)候,無(wú)論我怎么拍,孔底還是有殘留液體,請(qǐng)問(wèn)這對(duì)試驗(yàn)有沒(méi)有影響?或著有沒(méi)有別的什么好的辦法可以解決這個(gè)問(wèn)題?
答:有一定的影響.尤其二抗反應(yīng)后洗滌不好,會(huì)出現(xiàn)非特異.ELISA試驗(yàn)中洗滌是關(guān)鍵.盡可能甩干,而且盡量少拍,不一定每次都很干,但是zui后一次洗滌要盡量干.洗滌中另一個(gè)值得注意的是盡量不要出氣泡. 如果有條件的話,可用洗板機(jī)。
問(wèn)題二:什么才叫封閉好了呢?有沒(méi)有什么標(biāo)準(zhǔn)?
答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果還有非特異反應(yīng)的話,可能有其他原因,比如加樣時(shí)濺到了壁上或有氣泡,洗滌不充分,二抗?jié)舛冗^(guò)高,封閉物不合適以及反應(yīng)條件是否得當(dāng)?shù)取?/SPAN>
問(wèn)題三:1%bsa,你是用什么稀釋的,我用過(guò)pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結(jié)果封閉的效果都不怎么明顯,與不封閉差不多.
答:1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作,背景高不一定是封閉的問(wèn)題。
在我司技術(shù)的指導(dǎo)下,張老師相繼完成了人MDA、SOD、TAOC 三個(gè)ELISA實(shí)驗(yàn)。并且實(shí)驗(yàn)取得預(yù)期理想結(jié)果。張老師對(duì)我司的產(chǎn)品跟服務(wù)表示感謝。并表示后續(xù)將繼續(xù)與我司合作且將我司介紹給其他同學(xué)。在此,我司對(duì)張老師也表示感謝,承諾將一直為客戶提供zui的試劑盒跟服務(wù)!