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技術文章

Technical articles
小鼠I型膠原蛋白(Col I)ELISA試劑盒
更新時間:2022-07-29 點擊次數:592

【產品名稱】

中文名稱:小鼠I型膠原蛋白(Col I)酶聯免疫試劑盒

 

【包裝規格】

96T/盒

 

【預期用途】

僅供科研使用,本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中I型膠原蛋白(Col I)含量。

 

【檢測原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠I型膠原蛋白(Col I)水平。用純化的小鼠I型膠原蛋白(Col I)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入I型膠原蛋白(Col I),再與HRP標記的I型膠原蛋白(Col I)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的I型膠原蛋白(Col I)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠I型膠原蛋白(Col I)濃度。

【產品性能】

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝,無破損漏氣(如有漏氣,不影響使用)

2、劑量反應曲線線性

標準品劑量反應曲線相關系數r值,大于等于0.9900。

3、檢測范圍

15 μg/L -450 μg/L     

4、靈敏度

檢出劑量小于3.75 μg/L 

5、精密度

精密度用樣品測定值的變異系數CV 表示。CV(%) = SD/mean×100

批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批間差:選取3 個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定10 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批內差: CV<6.2%

批間差: CV<8.6%

6、回收率

分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。

注意:使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數量與表格是否一致。

需要但未提供的材料及耗材

  1、酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)

2、精密移液器、吸頭、加樣槽

3、蒸餾水或去離子水

4、洗瓶或者自動洗板機

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、EP管

7、無粉一次性乳膠手套

 

【儲存條件及有效期】

  1、2-8保存,切勿冷凍,有效期6個月。

  2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8冰箱。

注意試劑盒內酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在實驗后1 個月內使用完畢。產品過期時間以盒子上的標簽為準,保質期內所有組分都確保是穩定的。

【結果計算】

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。 



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