選擇質量優良的酶聯免疫試劑盒,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
加樣可能原因:
1.過長(特別是室內溫度較高時);
2.加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。.酶聯免疫試劑盒血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
3.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間
酶聯免疫試劑盒解決辦法:
1.標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,酶聯免疫試劑盒采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2.加樣后及時放入孵箱。
3.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4.如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5.標本較多時,請分批操作。
酶聯免疫試劑盒孵育可能原因:
1.孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,酶聯免疫試劑盒吸附于孔壁,難于清洗*;
2.孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,酶聯免疫試劑盒難以清洗*。
解決辦法:
1.貼封片或加蓋;
2.按說明步驟嚴格控制操作時間。
洗板可能原因:
1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2.采用半自動洗板機洗板時,酶聯免疫試劑盒洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3.反應板過多造成洗板等待時間長。
酶聯免疫試劑盒解決辦法:
1.保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2.合理安排,或多用幾臺洗板機。