血清、血漿只有一字之差,但是用途和實驗效果確實差了十萬八千里。了解清楚什么是血清血漿,在做實驗的時候也就清楚明了多了。首先,我們要了解什么是血清、血漿。
血清
血液凝結分出的淡黃色通明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反響被激活,血液迅速凝結,構成膠凍。其周圍所分出之淡黃色通明液體即為血清,也可于凝血后經離心獲得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿zui大的差異。而在凝血反響中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了改變。這些成分都留在血清中并繼續發生改變,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清寄存時刻逐步減少以致消失。這些也都是與血漿差異之處。但很多未參與凝血反響的物質則與血漿根本相同。為防止抗凝劑的攪擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。
血漿
相當于結締組織的細胞間質。是血液的重要組成部分,呈淡黃色液體。血漿的無機鹽主要以離子狀況存在,正負離子總量持平,堅持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學成分常在必定規模內不斷地改變,其間以葡萄糖、蛋白質、脂肪和激素等的濃度zui易受營養狀況和機體活動狀況的影響,而無機鹽濃度的改變規模較小。血漿的理化特性相對恒定是內環境穩態的首要體現。
其次,血清和血漿有以下三點區別:
1、血清中沒有纖維蛋白原
2、血清中無參與凝血中的血漿蛋白
3、血漿無一些凝血過程中血小板釋放的物質
在藥代研究中兩者各有優缺點:
1、血漿中含有抗凝物質(肝素或EDTA),可能會干擾化合物的檢測(結合等),血清則無
2、血漿中蛋白稍多,可能會在SPE中產生諸如堵柱子等情況,干擾樣本制備過程(這一點其實差別不明顯)
3、血漿制備快速,直接低溫或常溫離心后即可分離,血清制備耗時較長。這一點對藥代試驗影響較大,因為給藥后4小時內一般取血點都較為密集
4、血清的凝血過程可能會因為與藥產生吸附作用,從而減少血清的含量,并且有可能造成不平行。
再次,血清與血漿的收集方法也是不同的,血清血漿的收集方法如下:
1. 血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保 存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據標本的要求選擇 EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分 鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
綜上,我們在判定指標檢測可以選擇適用血清或者血漿,比如,檢測凝血功能選擇血漿,免疫類指標適用于血清。對于其他類型指標包含細胞因子的變化,都可以選擇。血清和血漿都有各自的優點和缺點。
那么我們也就知道血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。所以科研人員選擇用牛血清做細胞實驗的理由也就有如下幾點:
1、牛血清是細胞培養基中的中藥成份之一。在培養基中加入適量血清(10%),首先可以補充細胞生長所需的生長因子、激素、帖附因子等。
2、具有解毒作用,能解除脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。
3、它還能中止胰酶的作用,并保護細胞免受機械損傷等。但是血清成分復雜,不同來源、不同批號生產的血清對細胞生長作用的差異較大。血清的保存期只有一年,不同存放時期的血清的效力也不同。所以,當新購得的血清或要在開始一個重大試驗的時候,應首先進行牛血清的篩選。